都说养细胞等于养了个「孩子」,从此以后你的衣食住行、生活起居中都夹带着看「孩子」、给「孩子」喂饭、管理「孩子」的社交等杂事琐事。
然而这个科研界的「好大儿」实验,却异常矫情,能让科研人磨砺出其他实验带不来的美德。
孝顺:细胞在不远游,让你体验一下母慈子孝的感觉。
坚持:一次培养至少要花上两周,让你磨砺心性、成就大我
创新:只要有创意和勇气,你的培养皿里就能出现任意污染源
稳重:实验室发了 50 篇 SCI 的细胞被我亲手养死了
勇敢:因用错细胞系,导致课题组被疯狂撤稿
一次细胞培养至少小半个月,长的话可能要耗费 2 个月,从复苏到传代再到换液、分化,都需要小心翼翼。
有时候多看一眼它们,可能都会导致细胞「交友不慎」,陷入污染....... 为此,学霸君为大家整理了 5 个「坏孩子」污染源头的原因以及识别方式。
文末还附上了科研人细胞培养专项训练,一周跟练,让你的细胞得到一致的品控。
细菌污染:显微镜下的 「小点点」
细菌污染会在培养基中形成微小的沉淀物,这些「小点」在显微镜下清晰可见。
此外,培养基的变色、浑浊度的提升、细胞形态的突变,以及细胞生长速度的减缓,都是细菌污染的直接体现。
细菌污染的形态特征如下:
图源:小红书博主
图源:自制
细菌污染主要因为实验人员在细胞培养过程中未能严格遵守无菌操作规程。
如未能正确消毒或穿戴适当的个人防护装备,导致细菌通过皮肤、毛发或呼吸带入培养环境中。
此外,实验室环境若未定期清洁消毒,或使用的培养基和试剂本身存在污染,也易引发细菌污染。
真菌污染:培养基上的 「细丝线」
真菌污染会在培养基表面形成丝状或絮状物,这些「丝线」 是真菌生长的明显标志。
图源:小红书博主
图源:自制
真菌污染往往与实验室环境的湿度和通风条件有关,高湿度环境有利于真菌孢子的生长和繁殖。
使用受污染的培养基或血清,或实验器材未经过严格的消毒程序,也可能成为真菌污染的来源。
支原体污染:看不见的 「隐形者」
支原体污染难以通过光学显微镜观察,但它们会让细胞生长速度减慢,需要通过 PCR 等分子生物学方法来检测。
如果你发现以下征兆,又看不出明显的培养基变化,则可能为支原体污染。
图源:自制
支原体污染的一个主要原因是其体积微小,能够穿透常规的过滤膜,因此,在细胞培养过程中难以通过过滤手段去除。
病毒污染:细胞的恶性「病变」
病毒污染会导致细胞出现异常的细胞病理效应,如细胞融合或形成合胞体,这些变化在显微镜下容易识别。
图源:自制
病毒污染通常因为细胞培养物与受污染的生物材料接触,如使用未经充分筛选或验证的血清、血浆或细胞系,这些材料可能携带病毒或病毒核酸。
此外,实验室人员在操作过程中未能遵循严格的无菌技术,或实验室环境中存在病毒污染源。如受污染的设备或工作台面,也可能导致病毒污染。
细胞交叉污染:发生形态的「异变」
细胞交叉污染会让细胞形态发生改变,如细胞变大或变小,这些「异变」 在显微镜下可以观察到。
图源:小红书博主
图源:自制
交叉污染往往发生在细胞培养操作中,由于不同细胞系或株之间的直接接触,或使用未经彻底消毒的共享设备和耗材。
此外,实验室人员在处理多个细胞培养物时未更换手套或工具,或在不同细胞培养间未采取适当的隔离措施,都可能引起交叉污染。
交叉污染还可能源于细胞培养物的误标记或混淆,导致不准确的细胞系识别和使用。
这让珍贵细胞系「掉价」,便宜细胞系「鸠占鹊巢」,最后,让实验结果统统无效,结果要多惨痛就有多惨痛!
最后,环境因素如灰尘、不洁的设备等也可能导致细胞污染,需要大家保持实验室的清洁和无菌,给孩子打造一个良好的生存环境。
科研人细胞培养专项训练!
学霸君为科研人员准备了一份细胞培养专项训练计划,一周跟练,让你的细胞培养技艺更上一层楼,确保细胞得到一致的品控~
一周训练内容如下:
图源:自制
通过本文的介绍,学霸君希望你能对细胞培养有更深的了解,掌握污染的识别与处理方法,让你的「好大儿」培养之路更加顺畅。
记住,每一盘优质的细胞背后,都有一个细心呵护细胞的科研爸妈。
题图来源:图虫创意
我们长期为科研用户提供前沿资讯、实验方法、选品推荐等服务,并且组建了 70 多个不同领域的专业交流群,覆盖PCR、细胞实验、蛋白研究、神经科学、肿瘤免疫、基因编辑、外泌体、类器官等领域,定期分享实验干货、文献解读等活动。
添加实验菌企微,回复【】中的序号,即可领取对应的资料包哦~【2401】论文写作干货资料(100 页)【2402】国内重点实验室分子生物学实验方法汇总(60 页)【2403】2024 最新最全影响因子(20000+ 期刊目录)
【2404】免疫学信号通路手册
【2405】PCR 实验 protocol 汇总
【2406】免疫荧光实验 protocol 合集
【2407】细胞培养手册
【2408】蛋白纯化实验手册