作者|黄小玲,梁志刚,周玲慧单位|广东省第二中医院检验科

前言

随着科技的发展,大便常规也步入了自动化时代,相较原始的手工涂片镜检,极大减轻了工作负担,且质效兼备。但AI识别技术是否真的就可以完全代替人工镜检尚待论证!仪器也会出现识别错误和漏检等情况。

按照我国卫生行业标准WS/T 662—2020《临床体液检验技术要求》5.5.2实验室应制订手工复检的规则,当我们复核仪器识别结果存疑时,需进行人工复检,以确保结果的准确性。

案例经过

患者,女,63岁,广东阳江市阳西县农民。因“髋关节病”于2024年7月14日入住我院骨一科。患者主诉右髋部疼痛,活动稍受限,行走及下蹲时疼痛加重,无恶心,呕吐、腹泻等消化道症状。

入院后检查:血常规结果:白细胞6.83×10⁹/L;嗜酸性粒细胞百分比8.1%↑(正常范围为0.4%~8%);嗜酸性粒细胞绝对值0.55×10⁹/L↑(正常范围为0.02×10⁹/L~0.52×10⁹/L),其余指标正常(见图1)。

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图1 血常规结果

全自动粪便自动分析仪粪便常规检测结果显示:黄色、软便;查见夏科雷登结晶及蓝氏贾第鞭毛虫包囊(见图2),但形态并不清晰,需人工进一步复核。生理盐水涂片法镜下可见卵圆形的蓝氏贾第鞭毛虫包囊及夏科雷登结晶(见图3),经碘液染色后,包囊中间的核清晰可见,染成棕色(见图4),涂片经瑞氏-姬姆萨染色后油镜下观察,包囊结构更明显,细胞核2~4个不等,染成紫红色,胞质被染为淡蓝色,轴丝清晰可见(见图5)。

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图2 粪便常规结果

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图 3-1(未染色人工显微镜镜检拍摄400×)

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图 3-2(FA-280粪便仪图片)

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图 4-1(碘染色400×)

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图 4-2(碘染色400×)

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图 5-1(瑞吉染色1000×)

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图 5-2(瑞吉染色1000×)

案例分析

该例患者是广东阳江市阳西县农民,因髋部疼痛前来我院骨一科住院治疗,经询问得知患者7月13日到达广州,次日办理住院手续,发生居住点的改变(旅行史),7月15日粪便检查查见蓝氏贾第鞭毛虫包囊及夏科雷登结晶,血常规结果显示嗜酸性粒细胞偏高,检验人员立即致电临床医生,咨询患者的相关病情,医生告知:患者无腹痛、腹泻等消化道症状。

该患者粪便性状正常,镜检只查见蓝贾包囊,并未检出蓝贾滋养体,一般感染包囊后多为无症状,滋养体期为急性感染期,主要表现为急性胃肠道症状。因此该患者考虑为贾第虫无症状带虫者或贾第虫慢性感染。

知识拓展

什么是蓝氏贾第鞭毛虫?

蓝氏贾第鞭毛虫是一种寄生性肠道原虫,主要寄生于人和哺乳动物小肠、十二指肠,可引起腹痛、腹泻和吸收不良等症状。蓝氏贾第鞭毛虫呈全球性分布,在旅游者中发病率较高,引起感染并造成腹泻,故称“旅游者腹泻”[1]。

蓝氏贾第虫鞭毛虫的生活史简单,包括滋养体和包囊两个发育阶段:

滋养体:呈纵切为半的倒置梨形,长约为9~21mm,宽5~15mm,厚2~4mm。两侧对称,前端宽钝,后端尖细,腹面扁平,背部隆起,一对细胞核位于虫体前端1/2的吸盘部位。

滋养体有前、后侧、腹侧和尾鞭毛4对,均由位于两核间靠前端的基体发出,1对前鞭毛由此向前伸出体外,其余3对发出后在两核间沿轴柱分别向体两侧、腹侧和尾部伸出体外。1对平行的轴柱沿中线由前向后连接尾鞭毛,将虫体分为均等的两半,1对呈爪锤状的中体 (median body)与轴柱1/2处相交。鲜活虫体借助鞭毛摆动作活泼的翻滚运动[2]。

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(图片源于诸欣平,苏川等.人体寄生虫学.人民卫生出版社,2018:49.)

包囊:呈椭圆形,长8~14mm,宽7~10mm,囊壁较厚,与虫体间有明显的间隙。在碘染的标本内,可见未成熟包囊内含2个细胞核,成熟的含4个。胞质内可见中体和鞭毛的早期结构[2]。

传染途径:粪-口传播,水源传播是感染本虫的重要途径。

临床表现

贾第虫病临床表现的严重程度不一,一般而言,约半数的暴露者可在无临床症状的情况下清除感染,部分个体可无症状地排出包囊,剩余的个体则表现为症状性感染[3,4]。

个体临床表现可能取决于多种因素,包括分离株的毒力、寄生虫载量及宿主免疫力。症状通常出现于7-14日的潜伏期之后,急性症状通常持续1-4周[5]。本案例患者无腹痛、恶心等消化系统相关症状,粪便镜检只见蓝氏贾第鞭毛虫包囊,未见滋养体,考虑为无症状带虫者或慢性感染。

贾第虫病的治疗

常用治疗药物有甲硝唑(天滴灵),呋嘴唑酮(痢特灵)、替硝唑[6]。巴龙霉素多用于治疗有临床症状的贾第虫患者,尤其是感染本虫的妊娠期妇女。除上述药物之外,中药苦参、百步、槟榔、乌梅、蛇床子、雷丸对蓝氏贾第虫有灭杀、抑制作用。

案例总结

在日常的粪便显微镜检查中,寄生虫的鉴别多从大小,外形,内部结构以及流行病学史等方面入手,本案例中常需鉴别的几种寄生虫形态特点如下:

微小内蜓阿米巴包囊形态特征:圆形,大小直径5~10µm,成熟包囊有4个核,未成熟的为2个核,1核几乎不见。其核没有核周染色质粒,核仁较大。碘染以后大部分只能看到有2~4个黑点,外周光晕几乎看不清(见图6)。

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图 6-1(碘染色400×)

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图 6-2(碘染色400×)

人芽囊原虫形态特征:圆形或卵圆形,大小直径6~40µm,多数为4~15µm,空泡型人芽中央有一个透亮的大空泡,外周一环形胞质,核数目1~4个不等(见图7-1)。瑞吉染色后,核呈紫红色(见图7-2)。

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图 7-1(未染色400×)

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图 7-2(瑞吉染色1000×)

白细胞形态特征:圆形,大小12~16μm,未染色前高倍视野下观察,胞质充满颗粒,胞核不易看见(见图8),加稀乙酸可显示核结构,经瑞吉染色后油镜下观察,清晰可见分叶核。

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图8(未染色400×)

蓝贾包囊形态特征:呈椭圆形,长8~14mm,宽7~10mm,囊壁与虫体间有明显的间隙,可隐约看到中间的轴柱,内含2~4个核(见图9-1,9-2,9-3)。

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图 9-1(碘染色400×)

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图 9-2(未染色400×)

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图 9-3(瑞吉染色1000×)

心得体会

随着科技发展,自动化粪便分析仪的使用已经逐渐普及,替代了人工涂片的传统方法,大大提高了检验工作的效率和准确性,而且降低了实验室生物安全的交叉感染风险,但粪便分析仪在识别病理成分时也存在一定的假阳性率和假阴性率,必需严格遵守复检规则,以避免漏检或误报,这就要求我们检验人具备扎实的基本功。

“检以求真,验以求实”是我们检验人的宗旨。检验人的价值,并非临床医生眼中只懂按仪器开关的操作者,而是体现在显微镜下寻找“隐形凶手”,并把结果及时反馈临床的全过程。

专家点评

点评专家:李冉副主任技师广东省第二中医院检验科

蓝氏贾第鞭毛虫病已被列为全球危害人类健康的10种主要寄生虫病之一。蓝氏贾第鞭毛虫感染的实验诊断方法主要有病原学检查(粪便检查、小肠液检查、小肠活体组织检查)、免疫学检查(酶联免疫吸附试验、间接荧光抗体试验、对流免疫电泳试验)和分子生物学检查;

最常用的检查方法莫过于粪便常规检查了,因为该方法成本低廉、操作简便、易于实施,粪便样本检出蓝氏贾第鞭毛虫滋养体或包囊是确诊蓝氏贾第鞭毛虫感染的依据。

自动化粪便分析仪检测可提升工作效率,但仍需人工复核确认,各实验室应制定相应复检规则,并严格遵守,以免漏检及错报。同时作为检验工作者,要不断夯实自己的基础知识,方可迎接日常工作中的各种挑战。

参考文献

[1]Connor BA. Sequelae of traveler's diarrhea: focus on postinfectious irritable bowel syndrome[J]. Clin Infect Dis. 2005,41 Suppl 8:S577-S586.

[2]诸欣平,苏川等.人体寄生虫学:第九版[M].北京:人民卫生出版社,2018:49.

[3]Araki H, Shimizu S, Hayashi K, et al. Acute Acalculous Cholecystitis Caused by Giardia lamblia[J]. Intern Med. 2017;56(13):1657-1662.

[4]Dormond M, Gutierrez RL, Porter CK. Giardia lamblia infection increases risk of chronic gastrointestinal disorders[J]. Trop Dis Travel Med Vaccines. 2016;2:17.

[5]高翔,张峰,肖盟,等.慢性肾衰竭患者伴贾第虫病1例[J].中国感染与化疗杂志,2016,16(06):792-793.

[6]张维维,李雅杰.蓝氏贾第鞭毛虫病治疗的研究进展[J].热带医学杂志,2010,10(11):1356-1360.

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编辑:李玲 审校:陈雪礼