最近师姐突然萌生出一种「偷感」。问了一圈才发现，原来是 SCI 投稿在即，但师姐的免疫组化图迟迟做不出好看的，不是阴性就是掉片、要么背景脏。
导！我的样本真的不多了，这批不出结果，就要花大几万重新买鼠啦！
我有一本手册，里面有免疫组化20+ 问答解析以及标准组化 protocol凝结了为师毕生所学，拿走不谢！
丁香园联合诺唯赞推出「免疫组化全攻略手册」，包含石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片等免疫组化染色 protocol、以及6 年免疫组化经验总结、常见问题解析等，手把手带你解决染色背景高、没信号等问题，教你快速获取 get 低背景、高清 IHC/ICC 结果图！
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手册内容抢先看
3 大组化经典 protocol
宝典详细介绍了如何快速制备高质量的冰冻切片、石蜡切片以及细胞爬片，带你完善石蜡切片 IHC、冰冻切片 IHC、免疫细胞化学三大技术，通过标准化流程提升组化实验结果的准确性和可靠性。
免疫组化实战经验大集合
此外，宝典内还有更详尽的免疫组化问题难点解析、结果图分析等经验分享，以及免疫组化的应用解读，带你一站式搞定 IHC/ICC 常见难题，以下是手册部分内容节选，看看是否能够解决你的实验困扰：
Q1：组化染色结果弱，怎么解决？
1）抗体浓度过低，孵育时间过短：可提高抗体浓度，进行抗体 4℃ 过夜孵育。
2）组织或细胞中目的抗原表达水平低：可延长 DAB 显色时间或延长二抗孵育时间。
3）试剂超过有效使用期：及时更换试剂。
4）操作中，滴加试剂时缓冲液未沥干，致使试剂稀释：可每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥）。
5）蛋白封闭过度：封闭时间不要超过 2 h。
Q2：切片边缘着色怎么办？
1）样本边缘粘贴不牢，边缘松脱漂浮在液体中：增加清洗次数或延长清洗时间。
2）试剂未完全覆盖样本：边缘的试剂容易首先变干，浓度较中心高而致染色深。免疫组化笔画圈应距组织边缘大于 3～4 mm，试剂要充分覆盖组织，应超出组织边缘 2 mm。
Q3：又又又又脱片，怎么办？
1）烤片时间不够，或温度不够：可以延长烤片时间和提高烤片温度。
2）用含有多聚赖氨酸的玻片。
3）组织差异：有些组织本身就容易掉片，如骨组织等，进行清洗操作时洗涤液不要直接冲洗组织。
4）使用高温修复时，温度骤冷：进行高温抗原修复时，需等待液体缓慢恢复至室温。
5）冰冻切片未进行复温：冰冻切片应先于室温放置到复温后再浸泡至 PBS 中。
看到这里你是否也心动啦？
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内容审核：邹礼平
项目审核：吴军
题图来源：诺唯赞