共聚焦超分辨率FLIM显微镜

Photonscore LINCam在这里用作滨松CCD相机的直接替代品。探测器外壳具有 C 型内螺纹，可直接连接到 CSU。采集电子模块控制相机，并通过标准USB接口将采集的数据传输到计算机。需要脉冲激光器来执行时间分辨单光子计数。在这里，Omicron QuixX 488二极管激光器使用单模光纤耦合到CSU的光输入中。

来自大鼠的原代海马神经元。为了可视化兴奋性突触接触，用大鼠抗荷马、豚鼠抗 MAP2、大鼠抗 Ctip2 和小鼠抗 Prox1 抗体对神经元进行染色。随后，将样品与抗大鼠 Alexa 488-、抗豚鼠 Cy5- 和抗小鼠 Alexa 350- 偶联的驴二抗一起孵育。

淋巴细胞(Jurakt T 细胞)用单体 CFP-YFP Lck 生物传感器转染并受 CD3 刺激。固定后，用 Atto 647N 标记的抗 GFP 抗体对细胞进行免疫染色。光学切片清楚地显示了 Lck 阳性囊泡在质膜和内室之间的穿梭(很可能与高尔基复合体有关)。T 细胞的 FLIM 图像的强度加权 3D 堆栈，400 × 400 个箱，每片 20 秒。