作为一项检测特定蛋白质的有效方法,操作步骤繁琐、费用相对经济的蛋白质印迹法(Western blotting,WB) 为科学史的发展立下汗马功劳。以往不少人的惯有做法是裁剪凝胶或 WB 图像,裁剪过程会去掉图像中无关的部分,只呈现感兴趣的蛋白质。
然而,凝胶和 WB 图像的裁剪可能会出现问题,负面评价也随之而来,WB 不可避免地成了造假重灾区。
PLOS ONE曾对 2017 年到 2019 年伦理组处理的所有图像问题进行统计,发现 WB 图像问题位居首位,引得人们密切关注。
2019 年 7 月 1 日起,
PLOS ONE
PLOS Biology杂志均要求作者提供 WB 的原始数据,必须提供原始的,未剪切和最小化调整的图像,否则将对其实施拒稿操作。
来源:网络
如此强有力的举措势必将让更多的「妄图蒙混过关者」望而却步!
做好 WB 善后工作,认真阅读投稿指南
因此,做 WB 的小伙伴们一定要认真阅读各类杂志对于 WB 图片的投稿要求,做到有的放矢。在进行 WB 实验时,将每一个步骤都做到科学合理,留存好完整和原始的凝胶和图像,避免因为格式上的问题引起编辑误会,从而导致稿件被拒或需返工补充实验。
学术期刊多如过江之鲫,如果不知道怎么界定 WB 图片要求,跟着 CNS 期刊要求准没有错。
Nature杂志明确要求要提交未经裁剪图像,内参和目的蛋白在同一张膜上,尽量不跑平行胶,以保证实验数据的准确性。
Nature
Cell杂志直接提出需要提供实验各个环节的原始数据和图像,如果未按时提交,文章可能推迟发表或存在撤稿风险。
Cell
Diabetes杂志明确要求提交所有原始、未裁剪、未编辑的图像文件,包括计划在文章最终版中发表的所有 gels、Western Blots、显微照片等。
2024 年,著名的临床医学期刊Journal of Clinical Investigation(J CI)及旗下子刊JCI Insight要求,含剪裁 Blot/Gel 图像需提交包含所有裁剪印迹和凝胶未编辑图像的文件,还需要标注「图 [X] 的完整未编辑 Blot/Gel」 及对应通道。
此外,学霸君整理了部分期刊对于 WB 图片的明确要求,供大家参考。
学术道路千万条,科研诚信第一条
作为科研工作者,应心怀敬畏,严格地维护学术羽毛,按照 WB 实验要求去完成每一个细节,一定要遵守标准规则,做到原始数据的保留,数据作图的规范,将其作用发挥到最大,而不要被其反噬。
大家有什么 WB 经验分享吗,踩过哪些 WB 实验和投稿的坑呢?一起来评论区和学霸君讨论吧!
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