作者：seacat
据媒体报道，近日君赛生物申办的“一项评价自体天然肿瘤浸润淋巴细胞注射液（GC101 TIL）治疗晚期非小细胞肺癌患者安全性和有效性的开放标签、单臂、Ⅰb期临床试验（MIZAR-005）”正式启动。
该项研究招募对象为靶向和含铂双药失败的驱动基因阳性晚期非小细胞肺癌患者，入组接受GC101 TIL回输并继续接受低剂量PD-1单抗治疗（最多5剂）。
那么这个GC101 TIL具体是什么呢？它有什么特别的优势？能不能解决耐药问题？
什么是TIL疗法，有何特点？
TIL疗法是将肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）在体外筛选扩增后再回输到患者体内。那肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）又是什么呢？TIL是指那些离开血流进入到肿瘤中的白细胞。当存在大量的TIL时，表明机体启动了对抗肿瘤的免疫反应。这些TIL里面有专门对付肿瘤的免疫细胞。
TIL疗法就是从肿瘤样本中分离取得TIL，并筛选那些具有识别和杀伤肿瘤细胞能力的免疫细胞，进行扩增并回输至患者体内。所以TIL疗法它不是一种预先制备好的标准化的药物，而是涉及到肿瘤样本取样，免疫细胞分离筛选、体外扩增，细胞回输等一系列操作。
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与传统的DC-CIK疗法相比TIL疗法无疑更有肿瘤特异性。那么与CAR-T、TCR-T相比TIL疗法又有什么不同呢？
首先CAR-T、TCR-T是从正常血液中获取T细胞，这些T细胞并没有识别肿瘤的能力，需要后续通过不同的工程手段（CAR/TCR）使这些T细胞获得识别肿瘤的能力。由于是通过工程手段使T细胞获得识别肿瘤的能力，通常CAR-T、TCR-T都只能识别有限的一到两个肿瘤相关靶点，而实体瘤通常异质性较高，这就限制了CAR-T、TCR-T在实体瘤的应用。
TIL在治疗实体瘤方面可能有一些独特的优势。首先，TIL由于天然浸润在肿瘤组织内部，接触过多种肿瘤特异性抗原，所以可以识别和靶向多种特异性的肿瘤新生抗原，因此与其它过继性免疫细胞治疗（如CAR－T和TCR－T）相比，TIL在处理肿瘤异质性方面可能更具优势。与此相一致，TIL在含有高突变负荷的实体瘤（如黑色素瘤）中显示出比CAR－T更好的临床疗效。
其次，在体内受肿瘤抗原刺激后，TIL往往主要由效应记忆T细胞（Tem）组成，其表面表达趋化因子受体，如CCR5和CXCR3。与肿瘤特异性TCR一起，TIL在转移到患者体内后，可以很容易地定位于表达抗原的组织，包括肿瘤，就是说TIL更容易在回输后找到肿瘤。此外TIL脱靶毒性报道较少。
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传统TIL疗法流程和需要注意的问题
前面我们提过TIL不是一种预制的药物，不仅是打一针的事，涉及到一系列的操作，
传统TIL疗法过程主要包括：
- 通过手术或穿刺取得肿瘤组织，识别和分离肿瘤组织中的免疫细胞；
- 通过加入白细胞介素2(IL-2)等细胞因子刺激T细胞增殖；
- 对增殖后的T细胞进行筛选，留下对肿瘤细胞有免疫反应的克隆型；
- 患者开始一周的预处理治疗(清髓)以准备接受TIL，在TIL输注后立即接受多达6剂白细胞介素2(IL-2)，来支持患者体内TIL的生长和激活。
第一步取肿瘤组织样本，这个样本必须是新鲜的，取样可以是原发肿瘤，也可以是转移肿瘤，⽪肤型⿊⾊素瘤因为是⽪表病灶容易切除组织，所以取样最方便，但其他实体瘤肿瘤在体内，很多晚期患者并没有手术条件，这个时候穿刺获取肿瘤样本也可考虑，随着TILs扩增培养等技术的更迭和突破，通过肿瘤穿刺标本培养TILs的成功率也有了提高，不过最好仍然是通过微创手术获取整个肿瘤。
另外注意并不是所有肿瘤都有TILs，有研究报道，乳腺癌中原发灶中TILs整体比例显著高于转移灶。
因此为了保证取得足够的TIL，君赛GC101 TIL的临床研究要求患者至少有2个病灶，且身体可支持微创手术取材。取材病灶要求未接受过局部治疗（如放疗、射频治疗、溶瘤病毒、溶瘤细菌等)。
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第二、三步则需要时间，如君赛的GC101 TIL需要约12天，Iovance公司的LN-144需要16天。那么对于部分肿瘤处于快速进展阶段，症状急需缓解的患者，TIL疗法并不能解近渴。基于此君赛GC101 TIL的临床研究排除了脑转移且伴有临床症状或病灶大小不稳定的患者。
如果上述步骤都成功了，那么会在回输前进⾏一个“清髓“操作，即⽤大剂量化疗（通常为环磷酰胺或氟达拉滨）短暂压制身体免疫系统，利⽤这个时机回输扩增后的数⼗亿级TIL，并同时在体内继续用大剂量IL-2扩增。其原理主要是防⽌体外扩增后的TIL回输体内被免疫系统直接清除，⽽不是用化疗杀伤肿瘤；另一方⾯体内使⽤IL-2，是希望TIL在体内进⼀步扩增，达到持久的效应。这⼀步也很关键，然而严重的不良作⽤往往就在这个时候出现。⾸先大剂量化疗会导致⾝体⽩细胞等⼤幅降低，感染风险大增，患者需要在无菌病房甚至ICU进行清髓，其次回输后体内使⽤的大剂量IL-2往往⼜会导致各类不良反应。
清髓化疗和需要高剂量IL-2限制了传统TIL疗法的应用，也是新一代TIL产品需要攻克的难题，目前国内外均有在研的无需清髓和高剂量IL-2支持的TIL产品，包括中国的君赛生物GC101 TIL，国外的Institl Bio的ITIL-306。
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GC101 TIL，无需清髓，无需IL-2
君赛生物从TIL细胞的培养体系创新着手，自主建立DeepTIL®技术平台，实现TIL细胞无滋养细胞、无高浓度IL-2条件下的高效培养。就是说GC101 TIL体外培养时就适应了低浓度IL-2的环境，具有更强的体内适应能力，并避免对高浓度IL-2的依赖性，因而，GC101 TIL细胞回输前，仅需低剂量化疗预处理（无需达到清髓级别）；细胞回输后，无需补充注射IL-2，患者可在普通病房里接受治疗，大幅提高TIL疗法的安全性与可及性。
君赛GC101 TIL治疗流程 图源君赛生物
GC101治疗晚期实体肿瘤缓解率超35%，最长无瘤生存期近3年
先前GC101治疗晚期实体瘤 的I期临床试验数据显示客观缓解率超35%，已有4例患者肿瘤被完全清除，获得完全缓解(CR)疗效，其中无瘤生存最久时间已近3年。
试验中一例晚期肺腺癌患者，合并淋巴结、胸膜和骨转移。既往已行靶向治疗和放疗，疾病进展后入组GC101临床研究接受GC101 TIL回输后，未观察到明显不良反应，整体耐受性良好。分别于回输后6周、12周、18周、24周进行肿瘤影像学评估。第二次增强CT扫描显示靶病灶缩小36%，疗效评估为部分缓解(Partial Response，PR)，回输24周后病灶仍持续缩小。
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TIL或许是EGFR突变免疫治疗的关键
EGFR突变通常免疫治疗效果不佳，原因可能是EGFR突变肿瘤通常是“冷”肿瘤，缺少免疫效应细胞进入肿瘤内。但一些研究显示靶向治疗能重塑肿瘤微环境，靶向耐药的EGFR突变肿瘤倾向于由“冷”转“热”，有利于免疫治疗。但需要注意不是所有EGFR突变肿瘤靶向耐药后都转“热”，也有转“冷”的，因此EGFR突变免疫治疗试验的结果不一。
TIL疗法不同于PD-1/PD-L1单抗，由于已经收集了进入肿瘤的免疫细胞进行体外扩增再进行回输，避免了“冷”肿瘤的问题，再结合PD-1单抗减少免疫抑制，理论上对EGFR突变靶向耐药的肿瘤效果会比PD-1/PD-L1单抗更好，有可能是破解靶向耐药的解药。当然TIL制备仍需要时间，只适合那些身体状态较好，肿瘤缓慢进展的患者。
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参考文献
1．Cell Therapy With TILs：Training and Taming T Cells to Fight Cancer．Front Immunol． 2021；12：690499．
2． Perspectives of tumor－infiltrating lymphocyte treatment in solidtumors． BMC Med． 2021 Jun 11；19（1）：140．
3、国内3家企业产品相继获批临床，TILs疗法曙光已至
https://www.163.com/dy/article/H5T0JPEJ05118O92.html
4、https://clinicaltrials.gov/study/NCT06473961
5、元生创投Family | 君赛生物启动国内首个TIL治疗肺癌注册临床，大适应症拓展取得重要进展
https://bydrug.pharmcube.com/news/detail/79171edec9cf3f9411522e2f9d58815d
6、Chen Q, Xia L, Wang J, et al. EGFR-mutant NSCLC may remodel TME from non-inflamed to inflamed through acquiring resistance to EGFR-TKI treatment. Lung Cancer. Published online May 10, 2024. doi:10.1016/j.lungcan.2024.107815。