离大谱,折腾两天做的 WB,看到显影结果的那一刻,人都麻了……这歪七扭八的条带,仿佛是在嘲笑我(文中有免费试用)

别人做的:

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我做的:

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为什么会出现这种结果?最大的可能是WB 胶不均匀。你在 WB 制胶过程中是否也遇到这样或那样的问题呢,这里为你送上一份制胶 Tips!

1. 使用洁净干燥的玻璃板

制胶用的玻璃板加洗洁精,用流水清洗干净,一定确保玻璃板上没有残留的胶块。随后用超纯水再次冲洗,用吸水纸擦干后再使用。

2. 尽量使用新鲜配制的 APS

10% 的 APS 失效可能会导致胶难以凝固,最好现配现用,或储存在 -20℃ 冰箱。

3. 避免过量使用 TEMED

TEMED 用量过多会导致胶凝固过快,拔出梳子后泳道会出现胶丝。

4. 配好的制胶液体混匀后再加入制胶板中

最后一步加完 TEMED 后,迅速涡旋或者上下颠倒混匀,防止制胶不均匀。

5. 避免泳道中存在气泡

加入浓缩胶后,尽快插入梳子,倾斜 45 度小心插入,可避免产生气泡。

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「基础打不牢,地动摇三分」, 制一块上好的胶就是给 WB 打好基础。然而,繁琐的制胶过程总让人头疼不已,混匀各种试剂、等待上下层胶凝固,少说也得 1 h,任何一个步骤出错,胶都可能用不了。实在没把握,可以试试走「捷径」,确保制胶过程高效、省时省力!

即日起「SDS-PAGE AB 液快速制胶试剂盒」免费试用

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「制胶试剂盒」优势何在?

操作简单,上下层胶只需 AB 液等体积混合再添加促凝剂即可

经过优化我们将上层胶和下层胶分别分成了各 A、B 两个组分,制胶过程只需 A、B 液等体积混合再加促凝剂混匀即可进行灌胶,如手法熟练还可以同时灌注上层胶哦(即一步法制胶)。

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试剂盒提供 6%、8%、10%、12%、15% 五种常用浓度,满足绝大多数实验室需求;

安全无毒,经优化的配方不含 TEMED;

上层胶添加不影响实验的红色染料,清晰分辨上下层胶,同时方便上样;

配置完成的胶可承受 200~300 V 电压,可快速完成电泳过程。

以下为新手操作配置的胶

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一步法

(推荐不需转膜时使用)

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两步法

(推荐需要转膜时使用)

可以看出即使是新手也可以用我们的试剂盒配制出很完美的 WB 胶。心动不如行动,动动手指即可领取试用装,感受 WB 配胶快人一步!

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内容策划:王丹琦

内容审核:陈涵雅

题图及文中图片来源:自己做的