作者 | 高峰 曲锐
单位 | 山西医科大学第一医院
前 言
血小板计数检测是血液常规检查中非常重要的一项临床检验指标,尤其是对于多种原因引起的血小板减少患者。PLT-F通道又称为低值血小板通道，可专门对血小板进行染色，而且对血小板进行5倍颗粒分析技术。可避免小红细胞、红细胞碎片、大血小板及血小板聚集的干扰，使血小板结果更精确。
案例经过
患者，2017年因“免疫性血小板减少症”在天津某院行脾切除术，后又发现血小板减少。本次因心悸、气短加重入院治疗，在进行血细胞分析时，发现血象异常。
该患者血细胞分析在使用“CBC+DIFF”通道下进行标本检测时，结果显示大部分参数均异常，尤其以白细胞分类计数和血小板直方图呈某些特征性改变（图1）。白细胞分类计数散点图中原本被归类为非白细胞群的部分细胞被仪器识别为中性粒细胞，导致中性粒细胞绝对计数和百分比均出现偏差。同时，血小板直方图出现显著翘尾现象，计数值为50×109/L，依据常理推定，疑似受到红细胞碎片影响。
A：白细胞五分类异常散点图，红框所示为误判为中性粒细胞的非白细胞类细胞。B：CBC通道下的血小板直方图，红框所示为疑似翘尾区域。
图1
为排除对血小板计数的影响，我们采用低值血小板通道（PLT-F）对其进行检测并获得相应的血小板散点图（图2），此时计数值为133×109/L，但仍报警血细胞板分布不均。
同时该患者的PLT-F散点图最上方出现了一群不能被识别的细胞群，结合该患者在脾切除术后血小板计数长期保持在超过正常参考区间上限的水平，因而虽然本次PLT-F通道检测的血小板计数在正常参考 范围之内，但仍与患者的历史结果存在显著差异，值得对其进行进一步探究。
图2
为明确导致血细胞分析仪检测结果异常的原因，同时也为了给予患者提供准确的报告，我们使用DI-60全自动细胞形态分析仪对该患者的血液涂片予以检测，计数白细胞分类如下（图3A）。
通过对血涂片分析，我们可以明确该患者血液中存在大量的巨大血小板，计数值257×109/L（图3B），在仪器进行白细胞分类时，部分巨大血小板由于符合中性粒细胞的参数特征而被划入中性粒细胞群，从而导致白细胞计数、中性粒细胞计数及中性粒细胞计数百分比均假性增高。
这些巨大的血小板在影响白细胞计数及分类的同时，由于其巨大的体积已经超出血细胞分析仪对血小板体积的定义上限，因而不被认为是血小板，导致该患者PLT-F通道下检测出的血小板计数显著低于实际数量。
A：DI-60白细胞五分类百分比计算结果，红框所示为各类白细胞所占百分比。B：DI-60巨大血小板直计数结果，红框所示为巨大血小板计数。
图3
在明确导致血细胞分析仪分析结果出现异常的原因后，我们对患者进行白细胞和血小板的手工计数以及推片行瑞氏染色镜检（图4）。镜检结果示：白细胞计数结果为3×109/L，血小板计数结果为325×109/L。
图4 光学显微镜下可见大量巨大血小板散在分布
案例分析
该患者自2017年因“免疫性血小板减少症”行脾切除术后，共入本院治疗4 次，历次血细胞分析结果均显示呈该患者血小板呈持续增多状态，最高可达1029×109/L，且平均血小板体积（MPV）均超过正常参考范围上限。表明该患者血细胞分析结果始终受到巨大血小板影响。
目前，该型号血细胞分析仪在血小板计数方面共有三种检测方式：电阻抗法（PLT-I）、光学法（PLT-O）及荧光法（PLT-F）。
PLT-I ：
当不同于电解质的检测颗粒通过检测小孔时，会形成脉冲，脉冲振幅越高，体积越大，脉冲数量越多，检测颗粒数量越多（仅根据颗粒大小来区分血小板）。
❖优点：计数粒子较多，重复性好。
❖缺点：1.小红细胞、碎片会导致计数结果假性增高。2.大血小板、微小血小板，聚集会导致假性减低。
PLT-O
对网织红核酸成分的染色的过程中，也对血小板进行染色。
❖优点：可以有效去除小红细胞、红细胞碎片干扰。
❖缺点：1.颗粒计数比不上PLT-I，精密度比不上PLT-I；2.白细胞碎片会导致PLT-O结果假性增高。
PLT-F
其专门对血小板进行染色，而且对血小板进行5倍颗粒分析技术。
❖优点：
1. 选择性染色血小板，故网织红细胞难以染色，避免红细胞碎片影响,特异性强；
2. 5倍颗粒分析计数，提高检测结果精密度，使低值血小板更精确;
3. 可以有效排除微血小板的干扰；
4. 高灵敏度地检出血小板凝集。
总 结
在日常临床工作，由于PLT-F通道可显著提高发现血小板异常的能力，并且血小板计数结果更为准确。长此以往容易导致我们产生路径依赖，过度相信该通道的技术结果，而不对有异常的标本进行显微镜镜检。本例患者血液中的大量巨大血小板由其体积已超过仪器对巨大血小板的识别范围，导致检测结果显著低于显微镜镜检结果，PLT-F通道检测能力提出挑战。当存在报警提示及出现异常血液分析图形时应严格按照SOP操作进行，同时不要一味地依赖仪器，显微镜检 查一定要实行，以免造成不必要的误诊及漏诊。
参考文献
[1]袁莉,邓凯,李娜,仝晓宁. PLT-F通道在异常血小板计数检测中的价值.检验医学. 2019. 34(07): 610-612.
[2]李娟.低值血小板检测的方法学评价及影响因素分析:山东大学,2019.
[3]仵高强,晏纪军,崔姣,殷潇潇,王儒意,张博.血涂片复检在血常规检测中的重要性.贵州医药.2021.45(11):1799-1800.
[4]Schoorl VP, J.New fluorescent method(PLT-F)on sysmexXN2000 hematology analyze rachieved higher accuracy in low platelet counting.American journal of clinical pathology.. 2013.140(4).
[5]Juan C, Jing D,Saihui P, Zhicheng WU. Accuracy evaluation of PLT-F method on low concentration of platelet counting. Experimental and Laboratory Medicine. 2016 .
说明：本文为原创投稿，不代表检验医学新媒体观点。转载时请注明来源及原创作者姓名和单位。
近期视频推荐
编辑：徐少卿 审校：陈雪礼