细胞实验室杂菌指的是在细胞培养与实验中不应出现的杂菌。它们可能影响实验结果,故而需加以预防和控制。以下是一些常见的细胞实验室杂菌:

大肠杆菌,属常见肠道细菌,可能现身于实验中,通常经实验器具、培养基和试剂污染传播。

枯草芽孢杆菌,为常见土壤细菌,可能在实验中出现,通常通过培养基和试剂污染传播。

酵母菌,是常见真菌,可能会在实验中出现,通常经培养基和试剂污染传播。

铜绿假单胞菌,乃常见水生细菌,可能会在实验中出现,通常通过实验器具和培养基污染传播。

革兰氏阳性菌,作为一大类细菌,涵盖金黄色葡萄球菌、链球菌和肺炎克雷伯菌等。此类细菌处理起来较棘手,因其细胞壁较厚,对抗生素也具较强耐受性。

真菌,囊括酵母菌与霉菌,它们通常生长于潮湿环境。若实验室条件不当,真菌也可能污染实验样本。

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细胞实验室杂菌污染预防方法

微生物污染在细胞培养中是非常常见的,也是令人头大的一件事情。所以我们一定要将问题扼杀于摇篮之中,规范实验中的各个步骤,确保细胞“宝宝”在无污染的情况下健康成长。

1.实验进行前,准备好所需的试剂和器材。玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:

1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;

2)干烤消毒140℃2小时以上。

2.培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天,肉眼见无浑浊或沉淀等异物。分装后置4℃保存。

3.消化液(pH7.8)或其它加入液,应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤除菌,分装成支置-20℃保存。

4.超净台用紫外灯照射30-60min,并开启超净台风机运转5-10min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,再开始实验操作。

5.实验进行时,佩戴好口罩及手套,穿上洁净实验服,有长发则将长发扎起或者佩戴帽子,避免灰尘或唾液进入培养物中。

6.进入超净台前应用75%酒精对双手及手腕进行全面擦拭,确保除菌完全

7.实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内。

8.操作时小心取用无菌物品,应避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;手及物品不要在暴露的瓶口上方来往,容器打开后,倾斜45度操作,操作完成后及时盖上瓶盖。

9.每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。

10.实验用品用完应移出超净台,以利于空气流通;实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。

11.定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

12.此外CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,最后紫外灯照射1h以上或进行高温高压灭菌处理。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。

全新细胞实验室杂菌污染去除办法

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