新冠核酸假阴性,势必造成病毒扩散,疫情泛滥。而假阳性,则会引起相关人员无为的恐慌,甚至由此造成严重的医患纠纷。故实验室需要不断强化操作技术,做好实验室清洁、消毒工作,最大可能避免检验结果的异常,保证新冠核酸检测精准报告。

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在整个核酸检测流程中,都有哪些因素会造成假阴性结果,实验室通过哪些方面可以探究假阴性的原因呢?我们团队根据我们的经验,做了一些总结,与广大同仁一并分享、商榷。

那么,假阳性又会因何发生呢?我们跟踪核酸检测流程,逐步探究一下假阳因素,旨在广大同仁能够规避影响,保证实验结果。

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图源:大连发布

01

试剂污染

试剂污染囊括试剂盒本身污染及反应体系配制时污染。前者发生在厂家生产时,阳性对照或质控品对试剂的污染,可通过更换同一品牌不同批号,或采用其它品牌试剂检测来规避。后者则可通过重新配制反应体系来解决。

02

采集污染

这种情况多与标本采集与疫苗接种在同一区域相关,或者刚刚接种疫苗后进行核酸检测。更换区域,严格按照核酸检测要求时限进行核酸检测,可以有效避免此类假阳性。

03

溢洒污染

尽管核酸采集管为螺纹管帽设计,但在实际工作过程中,时常会见到因管帽关闭不严,导致标本溢洒的。一旦溢洒的为阳性标本,造成其他标本假阳性的几率倍增。解决此类污染,需要及时向标本采集、运送人员进行规范操作宣讲,盖盖严密,平稳运送,直立放置。

04

标本性状影响

粘稠标本,因其对于磁株的粘附作用,会造成新冠核酸检测结果,尤其是快速核酸检测结果出现误差,假阳/假阴均有可能。解决此问题,可静置标本后,再行检测。

05

加样污染

因新冠核酸检测标本量较大,且持续长时间重复性加样,工作中容易发生错孔加样,若错孔的正好是阳性标本,或者因员工操作技术不熟练,加样时喷溅、枪头残留滴溅等造成孔间污染,也会产生假阳性结果。解决此类污染,需要定时更换操作者,避免疲劳作业,并不断培训员工操作技能,保证规范操作。

06

室内污染

这种污染是所有PCR检测中最为担心的污染形式,一旦发生,因残余核酸片段不易清除,故对于核酸检测而言,几乎是毁灭性的。规避实验室污染,需要从实验室合理划分、空气流向、压力梯度、室内空气外排、人员着装规范等多方面考虑,而解决此类污染,则需要加强实验室监测、及时消毒通风、规范人员操作、试剂盒防污染设计(如加UNG酶等)或更换不同原理或扩增位点的试剂盒等。

07

耗材污染

PCR核酸检测使用耗材较多,包括手套、枪头、八联排管、鞋套、靴套、帽子、隔离服或防护服等。若耗材上残留或污染核酸或片段,也容易造成假阳性结果的出现。解决此问题,就是保证实验室不同区域规范着装,人员流动注意及时更换着装,使用带滤芯的枪头,库房远离实验室,加强耗材核酸清洁度监测等等。

08

人为因素

临界结果把控不准,结果判断不熟练,错孔观察结果,抑或未按规范要求进行复检等,均会出现假阳性结果。强化培训,端正态度,提高认识,是避免人为因素的关键。

阻遏疫情肆虐,新冠核酸检测为关键,于是针对新冠核酸检测便有了说不完、道不尽的话题。望疫情早日结束,祈盼我们早日恢复正常生活!

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来源:德安检验漫谈

编辑:笪文武 审校:陈雪礼