5 年技术实操老师亲授：荧光定量 PCR 实操技术及问题讲解

聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外扩增核酸片段的基因检测技术，具有简便易行、灵敏度高等特点。

传统的PCR定量是应用终点 PCR 来对样品中的模板量进行定量，通常用凝胶电泳分离，并用荧光染料来检测 PCR 反应的最终扩增产物。但是普通 PCR 扩增已经满足不了分子生物学的研究，荧光定量 PCR（Flurogenic Quantitative Polymerase ChainReaction，QPCR）技术实现了 PCR 从定性到定量的飞跃，以其快速、特异性强、重复性好、定量准确、可实时监测等优点成为了分子生物学研究中的重要工具。

本讲座是有 5 年技术操作老师以自身的实践经验出发，从 QPCR 原理及部分实验操作细节、异常结果分析以及处理建议、引物设计原则以及操作等方面讲解 QPCR 内容。

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图源：丁香通设计团队