目前，口服乙肝抗病毒药物研发问世后，它们的主要作用机制是逆转录酶或聚合酶抑制剂，在乙肝病毒生命周期的下游进行抑制HBV复制。但是，目前这种广泛使用的药物机制存在一定缺陷，即如果停止药物使用，乙肝病毒复制模板cccDNA由于在在宿主细胞核中的寿命长，而且高度稳定性，这一特性将导致病毒血症的复发。
乙肝基因技术领域，cccDNA低浓度影响，限制有效靶向/脱靶
除此之外，人们对该领域知识还需要补充，比如乙肝病毒基因组和宿主基因组的整合，是可以促进蛋白质库的形成，带给免疫系统额外压力。并且还将带来宿主通路的中断和致癌性，这主要取决于整合位置。因为目前HBV的整合特点，医药学家对此少有有效的HBV治疗方法，可能需要更多新方法，包括一些新兴技术来实现彻底根除HBV。
CRISPR/Cas9基因编辑，也就是在2020年大放异彩。CRISPR/Cas9其实是一种精确的DNA编辑技术，可以用来令cccDNA产生突变，从而使其结构失稳。全球最近有一项研究表明，基于CRISPR/cas9的系统能够抑制乙肝病毒复制。但是，参与者体内低浓度的cccDNA，限制了CRISPR/cas9系统的有效靶向、治疗分析和潜在脱靶向效应，这些都是影响着CRISPR/ cas9系统的成功实施。
此外，小番健康再介绍一下，更为科学研究相对成熟的基因沉默或通过RNA干扰（RNAi）技术，它是目前被医药学家证明，通过降解mRNA，可能降低乙肝病毒复制模板cccDNA水平的。当然，RNAi在研发过程中，也和CRISPR/Cas9相似，遇到了靶向准确性问题。并且RNAi的传递和稳定性，也是目前科研过程中的一个挑战，这些问题亟待解决。
RNAi技术，实现的一个例子是使用病毒传递系统。这个方向可能是有助于RNAi技术的持续进展，并保证精确地靶向人体肝细胞。全球有的科学家认为，为了获得更有效的结果，利用RNAi技术所开发的药物，可能在联合疗法之中获得成功。此外，N-乙酰半乳糖胺作为一种比较有前景的肝脏靶向技术，用来递送RNAi寡核苷酸，可以潜在地提高RNAi技术进入肝细胞的能力，而不需要基于乙肝病毒的递送机制。
另有一些HBV科研观点被提出，比如通过修改cccDNA的表观遗传图谱，进而破坏乙肝病毒基因组结构的治疗方法。这种科研观点也被证明是预防病毒载量的有效方法，HBV cccDNA可能存在3个甲基化区域，它们与ENI, X和核心启动子区重叠。这3个甲基化区域的高甲基化和低HBV转录组转录有关。此外，甲基化会改变乙酰化，导致cccDNA组蛋白相互作用的修饰。
所以，目前来看，深入了解cccDNA的表观遗传调控以及其对HBV复制的影响，将是未来有助于开发治疗HBV复制的表观遗传药物方向。比如，组蛋白去乙酰化酶SIRT3已被证实可导致cccDNA复制的减少。多项研究表明，包装HBV cccDNA的组蛋白具有修饰活性，可影响整体转录能力。使用特定的表观遗传修饰剂来降低cccDNA稳定性，可能抑制乙肝病毒的整体复制。
小番健康结语：以上就是科学前沿关于针对乙肝病毒复制模板cccDNA的药物开发技术进展。不难看出，治愈HBV的难点依然较多，一些新技术虽然已经应用在HBV的新药早期开发或进入人体临床试验，但同样会遇到一些棘手问题，而这些问题尚未解决。乙肝病毒复制模板cccDNA进入宿主细胞后，高度的稳定以及较长的半衰期（寿命），都是目前全球科研人员研究开发慢性乙肝新药技术的热门课题。