随着阿塞拜疆与亚美尼亚之间的冲突再次爆发，土耳其对阿塞拜疆表现出立即的偏见，一些人预计高加索地区冲突的未来将有2 + 2 + 1同盟关系公式出现：阿塞拜疆和土耳其与亚美尼亚和伊朗，俄罗斯担任调解人，尽管俄罗斯对亚美尼亚表现出偏见。这种同盟关系的公式是由于土耳其与伊朗在高加索地区进行竞争的性质以及伊朗不希望阿塞拜疆成为一个强大的国家，夺回其领土。
阿塞拜疆与土耳其结盟，并从伊朗转移天然气和石油的最重要项目的愿望。特别是土耳其将控制从高加索到欧洲-巴库-第比利斯-杰伊汉管道。虽然土耳其暂停了进口伊朗天然气和石油，转而购买阿塞拜疆的石油产品。伊朗还是宣布了中立的官方立场，对其采取的与冲突有关的措辞仅作了少许改动。
伊朗官方的口头禅一直要求通过谈判解决争端，而对阿塞拜疆的占领卡拉尔巴赫立场则不抱太大热情。伊朗还尝试充当调解人。但是俄罗斯拒绝让伊朗担任官方调解人，坚持要求在欧洲安全与合作组织下运作的明斯克集团担任官方调解人。由俄罗斯与美国和法国合作共同主持明斯克集团调解高加索战争。同时，阿塞拜疆方面认为，鉴于伊朗与亚美尼亚之间进行了重要的经济合作，尤其是在两国之间的天然气管道建设（于2007年启动）和伊朗在阿塞拜疆领土内实施道路项目之后，伊朗的中立性值得怀疑。
阿塞拜疆与亚美尼亚冲突在9月27日再次爆发后，土耳其当天迟迟未发表关于正在进行的战斗的第一份声明。与土耳其人不同，伊朗立即宣布立场，坚决站在亚美尼亚的后面。伊朗呼吁结束冲突，交战各方进行谈判。但是随着土耳其参战，大量土耳其武装无人机和F-16战斗机参战，伊朗的官方言论迅速改变，伊朗提到阿塞拜疆有权收回其在1994年被占领的整个领土。
阿塞拜疆总统伊拉姆·阿利耶夫宣布其制止战斗的两个条件：亚美尼亚返回阿塞拜疆领土和土耳其作为调解人参加谈判。土耳其参战和干预高加索情况将威胁伊朗在高加索地区的地位并加深土耳其在该地区的存在。伊朗希望通过官方声明来吸引阿塞拜疆。
伊朗对伊朗境内的阿塞拜疆人展开抗议活动，并且在其境内扩大化趋势表现出担忧。这个少数族裔占伊朗人口的20％，伊朗境内的阿塞拜疆人支持阿塞拜疆争取夺回其领土的努力。当许多阿塞拜疆人在伊朗驻巴库大使馆前抗议时高喊：“波斯人，俄罗斯人和亚美尼亚人是我们和土耳其人的敌人。”
大量伊朗籍阿塞拜疆人在大不里士和阿尔达比勒等伊朗籍阿塞拜疆人占多数城市举行的抗议活动之外，抗议活动谴责了伊朗对亚美尼亚的支持。这些抗议活动对伊朗的国内安全构成威胁，并可能导致阿塞拜疆裔少数民族对伊朗当局采取行动。为了平息局势并减轻伊朗阿塞拜疆人的怨恨，在阿塞拜疆占多数的四个省份：赞詹，阿尔达比勒，东阿塞拜疆和西阿塞拜疆的最高领导人的代表宣布，伊朗支持阿塞拜疆。伊朗确认说，伊朗领土不会被用来向亚美尼亚运送俄罗斯武器。